1.抗原或抗體的固相化及抗原或抗體的酶標記。
2.結合在固相載體表面的抗原或抗體仍保持其免疫學活性。
3.酶標記的抗原或抗體既保留其免疫學活性，又保留酶的活性。
4.受檢標本與固相載體表面的抗原或抗體起反應。再加入酶標記的抗原或抗體，也通過反應而結合在固相載體上。
5.此時固相上的酶量與標本中受檢物質的量呈一定的比例。
6.加入酶反應的底物后，底物被酶催化成為有色產物，產物的量與標本中受檢物質的量直接相關，故可根據呈色的深淺進行定性或定量分析。測定方法具有很高的敏感度(pg-ng/ml水平)，并且重復性好。
IL-1 elisa試劑盒的溫浴：
1.加標本后和加結合物后，應立即放入按規定的反應溫度的水浴箱。
2.各ELISA板不應疊在一起。
3.為避免蒸發，板上應加蓋，或將板平放在底部墊有濕紗布的金屬濕盒中。
4.加入底物后，反應的時間和溫度通常不做嚴格要求。如室溫高于20℃，ELISA板可避光放在實驗臺上，以便不時觀察，待對照管顯色適當時，即可終止酶反應。
IL-1 elisa試劑盒的洗滌：
1.洗滌在ELISA過程中不是反應步驟，但卻是決定實驗成敗的關鍵。
2.目的是洗去反應液中沒有與固相抗原或抗體結合的物質以及在反應過程中非特異性吸附于固相載體的干擾物質。
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